游離DNA（cell-free DNA ，cfDNA）顧名思義指存在于人體細(xì)胞外，游離于血液中的DNA。cfDNA可謂是體外診斷領(lǐng)域的新寵，通過對(duì)游離DNA的檢測(cè)，能夠克服傳統(tǒng)診療方法中的局限性，幫助醫(yī)生進(jìn)行腫瘤的相關(guān)診療、孕婦產(chǎn)前診斷及某些炎癥診斷......那么在體外診斷領(lǐng)域炙手可熱的cfDNA歷史發(fā)展與多項(xiàng)應(yīng)用到底是怎樣的呢？本期主要介紹游離DNA在無創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用。

游離DNA有一個(gè)重要應(yīng)用在于無創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)（Noninvasive Prenatal Testing，簡(jiǎn)稱NIPT）。1997年，香港中文大學(xué)盧煜明教授發(fā)現(xiàn)了孕婦外周血中存在游離的胎兒DNA(cell-free fetal DNA,cff DNA)，至此開辟了產(chǎn)前檢查的新領(lǐng)域。

NIPT的原理為提取孕婦外周血中游離DNA,結(jié)合NGS技術(shù)對(duì)孕婦血液中胎兒游離的DNA測(cè)序，并將測(cè)序結(jié)果進(jìn)行生物信息分析，可以從中得到胎兒的遺傳信息，從而檢測(cè)胎兒是否患有非整倍性染色體異常信息，比如21三體綜合征（唐氏綜合征）等疾病，或者單基因遺傳疾病。

NIPT&唐氏綜合征
唐氏綜合征是最常見的導(dǎo)致智力低下的疾病，也是最常見的由遺傳物質(zhì)缺陷導(dǎo)致的疾病，總體發(fā)病率在1/700左右。唐氏綜合征的發(fā)生是完全隨機(jī)的，每一個(gè)孕婦都面臨生育唐氏綜合征寶寶的風(fēng)險(xiǎn)。傳統(tǒng)對(duì)于唐氏綜合征的產(chǎn)前檢查方法主要是唐氏篩查。唐氏篩查是目前使用最廣泛的唐氏綜合征產(chǎn)前篩查手段。它的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、價(jià)格便宜，并且擁有較長(zhǎng)時(shí)間的臨床實(shí)踐積累。
唐氏篩查的主要問題是有相對(duì)較高的漏檢率和很低的特異性。唐氏篩查的漏檢率在30%左右，特異性約為1%-2%。
無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)對(duì)唐氏綜合征的漏檢率只有2%左右，而特異性達(dá)到99%左右。無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)在準(zhǔn)確性方面是一種遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于唐氏篩查的方法。與唐氏篩查相比，它的主要不足在于價(jià)格比較昂貴，并且臨床應(yīng)用時(shí)間短，長(zhǎng)期效果還需要觀察。

NIPT&羊水穿刺
如果在產(chǎn)檢流程中，胎兒頸項(xiàng)透明帶和唐氏篩查這兩項(xiàng)檢查出現(xiàn)異常，需要進(jìn)一步做羊水穿刺進(jìn)行確診。
傳統(tǒng)有創(chuàng)產(chǎn)前診斷技術(shù)主要包括絨毛取樣、羊膜腔穿刺和臍血取樣。臨床上以羊膜腔穿刺應(yīng)用范圍最廣，一般是在妊娠中期，在超聲實(shí)時(shí)監(jiān)護(hù)下，用細(xì)針經(jīng)腹部穿刺進(jìn)針，進(jìn)入羊膜腔后抽取20ml羊水，將羊水中的胎兒細(xì)胞收集起來，培養(yǎng)2周后經(jīng)過特殊處理，得到胎兒染色體并進(jìn)行核型分析。
因?yàn)榧?xì)針要進(jìn)入羊膜腔，可能導(dǎo)致流產(chǎn)、感染等并發(fā)癥，其中以流產(chǎn)較常見，穿刺后流產(chǎn)的發(fā)生率大約千分之三左右，這一概率不僅與孕婦本身體質(zhì)和孕周有關(guān)，也與穿刺醫(yī)生和超聲醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)有關(guān)，在熟練掌握的情況下，一般抽羊水過程大約2分鐘。

而NIPT技術(shù)只需采集5—10mL孕婦靜脈血，采血不需要空腹、不需事前檢查，孕婦可正常飲食、保證充分作息即可。此外，妊娠12周起就可進(jìn)行該檢測(cè)，因此與羊膜腔穿刺比，NIPT最大的優(yōu)點(diǎn)是取樣的安全性和檢測(cè)的早期性。

NIPT&單基因疾病
單基因病的無創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)，可以說是NIPT應(yīng)用的一大突破。在此之前，每種單基因病的檢測(cè)對(duì)應(yīng)一種實(shí)驗(yàn)方法。而現(xiàn)在可以用一種方法完成對(duì)多種單基因病的檢測(cè)；且該方法是采用無創(chuàng)方式進(jìn)行單基因病的產(chǎn)前檢測(cè)。目前，許多國(guó)家都會(huì)對(duì)本地區(qū)高發(fā)的單基因病進(jìn)行檢測(cè)。比如，美國(guó)對(duì)囊性纖維化疾病和鐮狀細(xì)胞血癥進(jìn)行檢測(cè)，東南亞國(guó)家對(duì)地中海貧血癥進(jìn)行檢測(cè)。若父母雙方均為單基因病攜帶者，則建議他們進(jìn)行羊水穿刺或絨毛穿刺等有創(chuàng)檢測(cè)，有創(chuàng)檢測(cè)都具有一定的流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)。
目前已發(fā)現(xiàn)的單基因病多達(dá)7000多種，由于種類繁多，綜合發(fā)病率高，是一類對(duì)人類健康造成嚴(yán)重?fù)p傷（致死、致殘或致畸）而且缺乏有效診治手段的頑疾，給社會(huì)以及家庭造成沉重的負(fù)擔(dān)。隨著無創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)一步臨床驗(yàn)證及臨床轉(zhuǎn)化，相信在不久的未來，無創(chuàng)產(chǎn)前單基因病檢測(cè)將惠及更多的孕婦。

目前，各國(guó)都在積極推廣NIPT。英國(guó)衛(wèi)生部預(yù)計(jì)，NIPT將在2018年或2019年被納入到英國(guó)國(guó)家衛(wèi)生服務(wù)（NHS）體系中。在國(guó)內(nèi)，地方省政府發(fā)布的基因檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用的支持政策中，均鼓勵(lì)開展高齡產(chǎn)婦無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)，并且關(guān)于將無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)納入醫(yī)保的聲音也越來越多。隨著國(guó)家二胎政策的開放，產(chǎn)前診斷需求量激增，大家越來越重視優(yōu)生，NIPT的普及可謂是廣大母親的福音。

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